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不知道如何使用免疫球蛋白elisa试剂盒?进来看

发布时间: 2022-04-15  点击次数: 654次
  免疫球蛋白elisa试剂盒是以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。以灵敏度较高、特异性较好的特点在科研上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。
  由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。应用双抗体夹心法测定标本水平。用纯化的抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入,再与HRP标记的抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
  下面要为您介绍的是免疫球蛋白elisa试剂盒的具体操作方法:
  1、洗涤液:用前配制,有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月,如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。
  2、显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制。
  3、标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存,有的是要现配制的,按照说明书操作;
  4、浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);原则是试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以后总量不够。
  5、加样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要注意加样问题。

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