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热休克蛋白elisa试剂盒在使用过程中常见的问题分享

发布时间: 2022-05-26  点击次数: 375次
   热休克蛋白elisa试剂盒以免疫学反应为基础,将抗原、抗体的特异性反应与酶对底物的高效催化作用相结合起来的一种敏感性很高的试验技术。由于抗原、抗体的反应在一种固相载体-聚苯乙烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种试剂孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。
 
  今天咱们来聊一聊热休克蛋白elisa试剂盒在使用过程中常见的问题:
 
  1、在使用过程中检查加样器:使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器。
 
  2、洗涤用水不规范:从冰箱中取出的浓缩洗涤液可能有结晶,属于正常现象,微加热至40℃使结晶*溶解后再配制洗涤液。(加热温度不要超过50℃)使用时洗涤液应为室温。
 
  3、加样不准确:应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
 
  那么又有哪些因素会导致其测定错误呢?
 
  1、样品稀释
 
  一般产品的样品稀释倍数均通过大量试验确定,以保证试验的灵敏度和特异性。酶联免疫反应是一种敏感性很高的反应,如果血清不稀释,不可避免会产生很强的非特异性反应,出现假阳性。
 
  2、试剂盒平衡
 
  Elisa中所有试剂和板条均应在试验前平衡至室温(约25℃),一般需在室温放置20~30分钟以上。平衡时间太短会造成试剂混匀不够,样品孵育时间相对缩短,ELISA反应不够充分。冬季室温低,可将试剂盒置37℃温箱20分钟。

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