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简述免疫球蛋白elisa试剂盒的具体操作方法

发布时间: 2022-06-01  点击次数: 370次
  免疫球蛋白elisa试剂盒中一般有两次抗原抗体反应,即加标本和加酶结合物后。保温的方式除有的elisa仪器附有特制的电热块外,一般均采用水浴,可将elisa板置于水浴箱中,elisa板底应贴着水面,使温度迅速平衡。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,此时可让反应板漂浮在水面上。
 
  今天咱们来了解下免疫球蛋白elisa试剂盒的具体操作方法:
 
  1、洗涤液:用前配制,有的试剂盒会标明,配好的4度下一般可以放一个月,如果没有标明,尽量用新鲜的,不要多配制。
 
  2、显色液(有A液和B液的),用前15分钟配制。
 
  3、标准品:有的试剂盒中标准品是已经配制好的,4度保存,有的是要现配制的,按照说明书操作。
 
  4、浓缩生物素结合的二抗和HRP:如果需要配制,试剂盒没注明配好可以保存多久的话,尽量现配现用(用前15分钟配制);原则是试剂盒上没有指出配制物的储藏方式的话,应该现配现用;不要怕麻烦;还有小瓶的管子开盖前要离心,以免盖子上粘连以后总量不够。
 
  5、加样:室温温育的试剂,特别是温育时间比较短的实验操作的试剂,加样对数据的影响比较大,特别要注意加样问题。
 
  含杂质较多的抗原也可选用捕获包被法,试验的特异性、敏感性均由此得以改善,重复性亦佳。蛋白质与聚苯乙烯固相载体是通过物理吸附联络的,靠的是蛋白质分子结构上的疏水基团与固相载体表面的疏水基团间的效果于。可将聚苯乙烯板先经紫外线照射(例如30W紫外灯,75cm照射12小时),以增加其吸附功能。

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