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简述如何减少兔ELISA试剂盒在试验中的误差

发布时间: 2022-10-08  点击次数: 153次
  兔ELISA试剂盒实验的原理似乎很简单,不外乎固定抗原,添加一抗、二抗和底物,间中夹杂着洗涤和封闭。然而,即使是平淡无奇的洗涤和封闭,如果做得不太好,也有可能毁了整个实验。在实验结束时,是否能获得有意义的信息,这在很大程度上取决于结果的信噪比,背景噪音会影响您对结果的判断。
 
  那么如何减少兔ELISA试剂盒在试验中的误差呢?
 
  1、评估试剂的实用性,试剂的安稳与否,对精确率的凹凸到头重要。在试剂启用前,应进行阴、阳对照及样品重复对比试验,判定试剂符合要求后方可运用。
 
  2、操作前仔细阅读说明书,严厉依照说明书要求进行规范化操作。不同批号的试剂不行混用。值得改善的地方,重复试验确认建立后才能改善,比方洗板次数的把握等。
 
  3、加样要精确、快速。加样不精确,酶生成物的量不能确认,直接影响显色成果。别的,显色的深浅及A值的测定与加入显色剂和终止液的量有关,所以加样应慎重。要求在必定时刻内加样结束的试验,如果加样缓慢,便出现差错,并且试剂长期露出在外,尤其室温过高时,保存期会缩短乃至失效。
 
  4、检验技师应具备从事试验室操作的基本素质和实践经验。能娴熟操作试验仪器、器械,具有必定总结和剖析问题的才能,对试验中出现的意外状况能及时妥善解决。
 
  5、运用校对过的微量移液器,排除天然差错。移液器精确与否对定量检测尤为重要。
 
  6、严厉把握显色时刻,显色时刻过短,加入终止液反应终止后,底物结合物的量过少,易出现假阴性。超越显色要求时刻后显色,应判为假阳性,这或许与试剂本身有关。加显色剂后当即显色,不行报阳性,这或许是本底显色的成果。
 
  7、洗刷*,洗板不*,酶结合物本底显色会出现假阳性。别的,洗刷液要新鲜,现用现配,陈旧的洗刷液会出现本底增高现象,也或许出现假阳性。
 
  8、严控反应时刻。反应时刻过长,酶失活;反应时刻过短,酶结合物不能与血清中的微生物抗原抗体充沛结合,生成物结构松散不牢固,容易洗掉,都或许形成假阴性。

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