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简述螺旋体IgGelisa试剂盒阴性本底的形成原因

发布时间: 2022-11-07  点击次数: 29次
  螺旋体IgGelisa试剂盒是指以酶作为标记物、以抗原和抗体之间免疫结合反应为基础的固相吸附测定方法。因此,一个测定试剂,其有机组成部分包括:包被的抗原或抗体的固相支持物,即聚苯乙烯塑料微孔或试管;酶标记的抗体或抗原和酶的反应底物等。
 
  在螺旋体IgGelisa试剂盒实验中,偶尔会遇到样品浓度挨近试剂盒的灵敏度就容易发生样本OD450值低于空白值的现象,特别是在血清和血浆样本中。这就有可能是基质效应导致的结果。
 
  首先我们要知道什么是基质,基质是指样品中目标分析物以外的部分。由于基质成分会对分析过程有显著干扰,影响分析结果的准确性。业内把这些影响统称为基质效应,这是该产品开发和使用中需要避开的雷。
 
  今天我们就谈谈螺旋体IgGelisa试剂盒中阴性本底的形成原因。酶联固相免疫实验中,尤其在简介ELISA法中,经常会碰到阴性本底的问题。主要是本底过高和不同标本的本底值差异较大。本底或称背景,是ELISA中的非特异性显色。底物未经过酶作用而呈现的颜色称为空白。底物液如配制不当会出现一定的空白值。这个空白值只要不太高(A<0.05),可从个测定值中减除,并不影响实验结果。这里研究的是不含待测抗原或抗体的阴性标本在ELISA中出现的本底。
 
  在酶免疫测定中,其特点是利用固相载体作为分离游离和结合的酶结合物的手段。固相载体与吸附在其上的抗原会抗体形成固相抗原或固相抗体,即免疫吸附剂。通常所用的固相载体聚苯乙烯其表面主要是疏水基团,通过疏水键与蛋白质结合。其中吸附式物理性的非特异性吸附,虽然蛋白质的分子量、等电点、浓度等对吸附的量有一定的影响,但总的来说各种蛋白质均能吸附在聚苯乙烯载体的表面。

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