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荧光定量PCR试剂盒

荧光定量PCR试剂盒

简要描述:荧光定量PCR试剂盒例如:ELISA检测试剂盒、ELISA Kit、酶联免疫试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒、酶联免疫分析试剂盒、酶免试剂盒等,比较常见的叫法是ELISA检测试剂盒、酶联免疫吸附测定试剂盒等。

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所属分类:荧光定量PCR试剂盒

更新时间:2022-03-10

厂商性质:生产厂家

详情介绍
品牌其他品牌供货周期两周
应用领域医疗卫生,生物产业

荧光定量PCR试剂盒(Real-time PCR试剂盒) 是2×浓缩的实时定量PCR扩增的预混合溶液。该预混液中含有热启动Taq酶,SYBR Green I,dNTP,Mg2+ , Enhancer , 特殊稳定剂、优化的反应缓冲液,具有灵敏度高、特异性强、稳定性好等特点。

荧光定量PCR试剂盒使用时,仅需在扩增体系中加入模板和引物即可进行实验,大大简化操作过程,缩短操作时间,降低污染概率。

本品采用全新的化学修饰的热启动聚合酶,常温下完全封闭聚合酶的活性,可有效抑制非特异性产物扩增,从而显著提高PCR反应的扩增效率,使定量PCR可以在宽广的定量区域内获得良好的线性关系。

产品名称

规格

价格

ReliaTM SYBR QPCR Mix

1ml

询价

5ml

     

产品优势:

  • 特异性强:能对低拷贝基因或多样性模板的定量,具有高特异性和灵敏度;

  • 灵敏度高:采用热启动酶的激活机制,可以在室温条件操作,减少非特异性扩增;

  • 扩增效率高:荧光定量扩增曲线Ct值低,起峰快,效率高。

产品应用:

  • 基于荧光定量PCR检测;

  • 核酸扩增和基因表达;

  • 自动化和高通量的定量基因分型研究;

  • 基因组学相关应用。

注意事项:

1.由于本品检测灵敏度*,即使空气中微量的DNA气溶胶都可以引起污染,进而导致实验失败。因此反应体系配制时请于超净工作台内进行,配制过程中请使用干净灭菌枪头、反应管,条件容许的实验室推荐使用专用的移液枪,避免交叉污染。

2.由于本品中含有荧光染料SYBRGreen I,因此无论保存还是配置反应体系时都应该尽量避免强光照射。

3.本产品中不含用以校正孔与孔之间产生的荧光信号误差的Rox ReferenceDye,客户可根据qPCR仪器技术指导决定是否需要加ROX内参染料,用于消除信号本底以及校正孔与孔之间产生的荧光信号误差。

4.建议在冰上配制PCR反应液,再放入PCR仪器中扩增。可以提高扩增特异性,减少背景。

5.模板DNA:用本产品,cDNA、基因组DNA、质粒DNA、病毒DNA等都可作为模板。在添加DNA模板时请注意模板量对PCR扩增的影响。本产品建议添加量为:cDNA添加量不应超过总反应体系的10%;基因组DNA为模板时,为避免在高浓度区域出现线性差的情况,请注意添加量小于500ng;病毒DNA也可作为PCR模板,添加时请以300ng为上限;由于质粒DNA浓度和拷贝数很高,在添加PCR模板之前最好进行稀释梯度试验,以便确定合适的质粒DNA拷贝数。

QPCR反应体系配制

试剂

体积

终浓度

ReliaTMSYBR qPCR mix

25 μl

Forward Primer 10uM

1 μl

0.2 uM

Reverse Primer 10uM

1 μl

0.2 uM

模板DNA

x μl

x

无菌超纯水

Up to 50 μl

PCR扩增反应条件

步骤

温度

时间

过程

预变性

95℃

15min

预变性

变性

95℃

10 s

循环反应(40 cycles)

退火

55~60℃

20 s

延伸

72℃

20 s

变性

95℃

15 s

熔解曲线

退火

60℃

60 s

延伸

95℃

15 s

结果与分析:
PCR扩增结束后,加做熔解曲线,以区分扩增产物及引物二聚体。根据扩增曲线和熔解解曲线结果可进行PCR定量标准曲线的制作。

 

 

 

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